［摘  要］ 目的：調(diào)查慢性前列腺炎細(xì)菌感染情況及幾種主要細(xì)菌對(duì)多種抗生素的耐藥性監(jiān)測(cè)，為有效控制慢性前列腺炎提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)，指導(dǎo)臨床用藥。方法：對(duì)385例慢性前列腺炎患者采用MearesStamey四段取樣法作前列腺液細(xì)菌培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)，對(duì)長(zhǎng)期使用抗生素及原因不明的感染患者加做L型細(xì)菌培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)。結(jié)果：在385例慢性前列腺炎患者普通細(xì)菌培養(yǎng)共分離出123例陽(yáng)性標(biāo)本，陽(yáng)性率為31.9％。葡萄球菌感染92例，占感染率23.8％（其中凝固酶陰性葡萄球菌感染64例，占16.6％；凝固酶陽(yáng)性葡萄球菌感染28例，占7.2％）；鏈球菌感染18例，占4.6％，革蘭陰性桿菌感染13例，占3.4％；L型細(xì)菌培養(yǎng)12例，陽(yáng)性率為3.2％；混合感染病例為11例，占2.9％。結(jié)論：慢性前列腺炎的細(xì)菌感染分布以革蘭陽(yáng)性球菌為主，其中凝固酶陰性葡萄球菌所占的比例zui高；對(duì)于長(zhǎng)期大量使用抗生素而普通培養(yǎng)陰性的患者加做L型細(xì)菌培養(yǎng)，對(duì)提高慢性前列腺炎細(xì)菌感染檢出率有重要的意義；對(duì)于細(xì)菌引起的慢性前列腺炎，在選用的抗生素中，由于不同的細(xì)菌對(duì)藥物的敏感性不同，選擇敏感的藥物對(duì)有效治療慢性前列腺炎有重要的意義。
　　［關(guān)鍵詞］ 四段取樣法慢性前列腺液細(xì)菌培養(yǎng)；細(xì)菌鑒定；藥敏試驗(yàn)

　　慢性前列腺炎在成年男性人群中具有較高的發(fā)病率，近年來(lái)尤呈上升趨勢(shì)，是男性學(xué)科zui常見(jiàn)的但又難以有效治愈的嚴(yán)重疾病之一。患者病程遷延，由于長(zhǎng)期大量使用抗生素，造成反復(fù)發(fā)作，難以治愈。我院針對(duì)臨床慢性前列腺炎患者采用Meares［4］“四段法”進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)并檢測(cè)細(xì)菌β內(nèi)酰胺酶、MRSA、MRCNS和ESBL，及時(shí)為臨床提供耐藥菌株信息，對(duì)合理使用抗生素和對(duì)因治療前列腺炎起到重要作用。

　　1  材料及方法

　　1.1  標(biāo)本來(lái)源及樣本采集  2002年10月至2004年9月本院泌尿外科門(mén)診患者385例，年齡20歲~70歲，平均年37歲，臨床疑為慢性前列腺炎患者。取樣前先做外陰及尿道外口消毒，采用初始尿（VB1）、中段尿（VB2）、前列腺液（EPS）及終末尿（VB3）MearesStamey四段取樣法取前列腺液及尿液于無(wú)菌試管內(nèi)送檢。

　　1.2  普通細(xì)菌培養(yǎng)  分別將VB1、VB2、VB3、EPS定量接種于血瓊脂平板和巧克力平板上，（35±1）℃5%~10％二氧化碳培養(yǎng)24 h，做細(xì)菌菌落計(jì)數(shù)及細(xì)菌鑒定。以EPS+VB3的細(xì)菌計(jì)數(shù)>VB1+VB2細(xì)菌計(jì)數(shù)的2倍為陽(yáng)性，否則為陰性［4］。L型細(xì)菌培養(yǎng)：對(duì)培養(yǎng)陰性，長(zhǎng)期使用抗生素反復(fù)感染患者加做L型細(xì)菌培養(yǎng)。將EPS定量接種于L型高滲增菌培養(yǎng)基，（35±1）℃ 5%~10%二氧化碳培養(yǎng)6 d內(nèi)觀察結(jié)果，培養(yǎng)增菌液混濁或附壁細(xì)菌生長(zhǎng)時(shí)，轉(zhuǎn)種于血平板或L型固體培養(yǎng)基。培養(yǎng)基來(lái)來(lái)源：L型高滲增菌培養(yǎng)基：衛(wèi)生部上海生物制品研究所產(chǎn)生。L型固體培養(yǎng)基：新鮮牛肉浸液80 ml，蛋白胨2 g，氯化鈉5 g，瓊脂0.8 g，明膠3 g加熱溶解后，校正pH 7.4~7.6，121 ℃高壓滅菌20 ml，待冷至56 ℃左右時(shí)，加入滅活人血漿20 min，傾注平板，冷卻后放4 ℃冰箱備用。

　　1.3  菌株鑒定及藥敏試驗(yàn)  采用湖南天地人公司提供半自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀及鑒定板，包括細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn)，ESBL及β內(nèi)酰胺酶檢測(cè)。質(zhì)控菌株為金葡萄球菌ATCC25923、大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853，由河南省臨床檢驗(yàn)中心提供。

　　2  結(jié)果

　　2.1  鑒定結(jié)果  在385例慢性前列腺炎患者中分離出123例陽(yáng)性標(biāo)本，陽(yáng)性率為31.9%。其中葡萄球菌感染92例，占感染率23.8％（其中凝固酶陰性葡萄球菌感染64例，占16.6%；凝固酶陽(yáng)性葡萄球菌感染28例，占7.2％）；鏈球菌感染18例，占4.6％；革蘭陰性桿菌感染13例，占3.4％，見(jiàn)表1。

　　2.2  藥敏試驗(yàn)  見(jiàn)表2。

　　2.3  L型細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果  共培養(yǎng)出12例，陽(yáng)性率為3.2％。其中腸球菌感染6例，表皮葡萄球菌感染4例，金葡萄球菌感染1例，中間型葡萄球菌1例。

　　2.4  混合感染病例  123例陽(yáng)性結(jié)果中有11例為混合感染病例，其中腸球菌與表皮葡萄球菌感染2例，溶血葡萄球菌與大腸埃希菌感染2例，表皮葡萄球菌與中間型埃希菌感染2例，金葡萄球菌與表皮葡萄球菌感染2例，奇異變形桿菌與大腸埃希菌感染1例，表皮葡萄球菌與草綠色鏈球菌感染1例。

　　表1  123例慢性前列腺液中病原菌的種類(lèi)及所占比例（略）

　　2.5  MRS檢測(cè)結(jié)果  在凝固酶陽(yáng)性葡萄球菌感染28例，MRSA13例，占46.4%；凝固酶陰性葡萄球菌感染64例，MRSCNS 20例，占31.2％。β內(nèi)酰胺酶檢測(cè)，葡萄球菌陽(yáng)性25例，占27.1％；陰性67例，占72.9%。

　　3  討論

　　慢性前列腺炎是成年男性常見(jiàn)的疾病，以發(fā)病緩慢，病因病理復(fù)雜，反復(fù)發(fā)作，經(jīng)久難愈為特點(diǎn)，前列腺炎分為細(xì)菌性前列腺炎和非細(xì)菌性前列腺炎兩類(lèi)，臨床上以非細(xì)菌性前列腺炎為主。近年來(lái)，隨著抗生素的廣泛使用及性病的蔓延，細(xì)菌性前列腺炎比率在逐年增高。因此了解慢性前列腺炎細(xì)菌的感染情況，選用敏感的抗生素對(duì)因治療，對(duì)慢性前列腺炎的治療有極其重要的臨床意義。

　　20世紀(jì)60年代后期，Meares等［4］提出了下尿路感染定位診斷的“四段法”，并被視為確定前列腺細(xì)菌感染的金標(biāo)準(zhǔn)。從本組“四段法”分離的123例病例的檢查結(jié)果看，慢性前列腺炎患者前列腺液細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率31.9％較高，并以革蘭陽(yáng)性菌多見(jiàn)，主要是凝固酶陰性葡萄球菌，腸桿菌和鏈球菌也占有相當(dāng)?shù)谋壤Ｄ壳芭R床上已有大量資料證明葡萄球菌是細(xì)菌性前列腺炎的主要致病菌［2，3］。本組試驗(yàn)中分離葡萄球菌92例，其中凝固酶陰性葡萄球菌（CNS）感染64例，表皮葡萄球菌占39例，占10.1％。由于患者長(zhǎng)期使用抗生素，使普遍認(rèn)為沒(méi)有致病性的凝固酶陰性的表皮葡萄球菌成為機(jī)會(huì)感染的重要病原菌。表皮葡萄球菌能產(chǎn)生粘質(zhì)物，粘質(zhì)解體后，可使細(xì)菌粘附于細(xì)胞表面，能保護(hù)細(xì)菌免受中性粒細(xì)胞的吞噬和減弱抗生素的滲透性，促進(jìn)了CNS的感染，使之在一定條件下成為機(jī)會(huì)感染的重要條件致病菌。表皮葡萄球菌在男性前列腺炎的致病特性，應(yīng)引起臨床的高度重視。凝固酶陽(yáng)性葡萄球菌感染28例，感染率占7.2％；其次為鏈球菌感染18例，感染率為4.6％；革蘭陰性桿菌感染13例，感染率3.4％。

　　對(duì)EPS細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性者，應(yīng)根據(jù)藥敏試驗(yàn)選擇合適的抗生素進(jìn)行治療。本試驗(yàn)MRS檢測(cè)表明MRSA46.4％，MRSCNS 31.2％；β內(nèi)酰胺酶檢測(cè)陽(yáng)性為27.1％。由于MRSA對(duì)β內(nèi)酰胺酶類(lèi)抗生素不論藥敏結(jié)果如何均視為耐藥，所以在治療MRSA、MRSCNS感染時(shí)有選擇的抗生素范圍很窄。以往認(rèn)為的治療慢性細(xì)菌性前列腺炎，大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)、復(fù)方新諾明和喹諾酮類(lèi)等是比較好的藥物。但從耐藥性監(jiān)測(cè)表明，對(duì)于革蘭陽(yáng)性球菌引起的慢性前列腺炎，青霉素和紅霉素，喹諾酮類(lèi)藥物（環(huán)丙沙星與氧氟沙星），葡萄球菌均顯示較高的耐藥性，已不能作為治療用藥，從藥敏分析可以看出，二、三代頭孢與三代喹諾酮的左氧氟沙星耐藥率低，可以作為經(jīng)驗(yàn)性治療用藥；對(duì)于腸桿菌科細(xì)菌引起的慢性前列腺炎，腸桿菌科細(xì)菌均對(duì)氨芐西林顯示*的耐藥性，而對(duì)其他β內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素均較敏感，因此二、三代頭孢菌素與三代喹諾酮左氧氟沙星是比較好的治療藥物，慶大霉素和環(huán)丙沙星可作為次選藥物。另外，在所有的腸桿菌科細(xì)菌當(dāng)中，未檢出產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶（ESBL）菌株。在鏈球菌屬中（以腸球菌為主），細(xì)菌對(duì)青霉素、氨芐西林、高劑量慶大霉素及萬(wàn)古霉素較敏感，可作為及次選藥物，而對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素、四環(huán)素類(lèi)抗生素、利福平與克林霉素均顯示較高耐藥率。本試驗(yàn)未檢出耐萬(wàn)古霉素的腸球菌（VER）。

　　在一般細(xì)菌培養(yǎng)陰性者除考慮厭氧菌、支原體與衣原體外，L型細(xì)菌感染可能也是重要的因素。本實(shí)驗(yàn)在檢測(cè)陽(yáng)性的L型EPS細(xì)菌培養(yǎng)中已初步得到證實(shí)，因此對(duì)原因不明前列腺炎者除做EPS常規(guī)細(xì)菌培養(yǎng)外，應(yīng)同時(shí)進(jìn)行L型細(xì)菌的培養(yǎng)，這對(duì)提高確診率，減少漏診誤診很有必要。本文檢測(cè)了385例慢性前列腺炎患者的EPS，其中按常規(guī)方法培養(yǎng)細(xì)菌，陰性率為68％（262例），在262例常規(guī)培養(yǎng)陰性的標(biāo)本中，細(xì)菌L型培養(yǎng)則又培養(yǎng)到12例L型細(xì)菌，占4.5％（12／262）。表明對(duì)慢性前列腺炎患者在做細(xì)菌常規(guī)培養(yǎng)的同時(shí)，進(jìn)行細(xì)菌L型培養(yǎng)，可提高檢出率。尤其是接受過(guò)各種抑制細(xì)胞壁合成的抗生素治療的患者，已使細(xì)菌呈不同程度的缺壁狀態(tài)，細(xì)菌常規(guī)培養(yǎng)可能呈陰性。故建議在臨床上對(duì)慢性反復(fù)發(fā)作、經(jīng)久難愈的前列腺炎患者，應(yīng)加做細(xì)菌L型培養(yǎng)。

　　慢性前列腺炎混合感染是疾病久治不愈、細(xì)菌耐藥性增高的因素之一，主要表現(xiàn)為細(xì)菌性和非細(xì)菌性病原體感染同時(shí)存在，兩種細(xì)菌同時(shí)存在的混合感染。本試驗(yàn)結(jié)果表明123例陽(yáng)性結(jié)果中就有11例為混合感染病例（其中有陽(yáng)性球菌與陰性桿菌，凝固酶陽(yáng)性的葡萄球菌與凝固酶陰性的葡萄球菌，腸球菌與葡萄球菌等）。因此，對(duì)慢性前列腺炎病程較長(zhǎng)的患者，臨床更應(yīng)注重前列腺液細(xì)菌學(xué)的檢測(cè)，針對(duì)病因進(jìn)行有效治療是一個(gè)重要的環(huán)節(jié)。由此可見(jiàn)EPS的細(xì)菌學(xué)檢測(cè)對(duì)臨床診治慢性前列腺炎具有重要意義。抗生素是治療慢性前列腺炎的常用方法，但不可忽視醫(yī)源性前列腺炎在目前慢性前列腺炎中所占比例逐漸增高的事實(shí)。文獻(xiàn)報(bào)道，在院內(nèi)感染中革蘭陽(yáng)性球菌感染呈逐年上升趨勢(shì)，而在慢性前列腺炎感染方面，這種現(xiàn)象更為突出。其原因無(wú)不與臨床上大量濫用抗生素，引起多重耐藥性相關(guān)。慢性前列腺炎患者病程越長(zhǎng)，應(yīng)用抗生素種類(lèi)越多，其耐藥性越高。所以，選用恰當(dāng)?shù)乃幬铮?guī)范、針對(duì)性用藥，對(duì)防止慢性前列腺炎的遷延和復(fù)發(fā)有重要意義。